کلونینگ و بیان ژن کد کننده راپتری سیزده (ROP۱۳) سویه RH توکسوپلاسما گوندیی
- سال انتشار: 1397
- محل انتشار: مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران، دوره: 28، شماره: 169
- کد COI اختصاصی: JR_JMUMS-28-169_003
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 70
نویسندگان
Msc Student in Parasitology, Students Research Committee, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran
Professor, Department of Parasitology, Toxoplasmosis Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran
Assistant Professor, Department of Parasitology and Mycology, Faculty of Medicine, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran
Associate Professor, Immunology Research Center, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran
Assistant Professor, Department of Parasitology and Mycology, Faculty of Medicine, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran
Associate Professor, Department of Parasitology and Mycology, Faculty of Medicine, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran
Msc Student in Parasitology, Students Research Committee, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran
Msc Student in Parasitology, Students Research Committee, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran
Assistant Professor, Immunology Research Center, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran
چکیده
سابقه و هدف: توکسوپلاسما گوندیی انگل تک یاخته درون سلولی اجباری می باشد. با توجه به شیوع بالای توکسوپلاسموزیس و اهمیت وافر این بیماری در بهداشت عمومی، دستیابی به واکسن موثر و روش های تشخیصی حساس برای این بیماری، بیش از پیش حائز اهمیت است. هدف از این بررسی، شناسایی و کلون کردن ژن کدکننده پروتئین ROP۱۳ سویه RH انگل توکسوپلاسما گوندیی و بیان آن در سلول یوکاریوتیک CHO بود. مواد و روش ها: در این تحقیق، ژن ROP۱۳پس از تکثیر با روش PCR، در پلاسمید انتقالی pTG۱۹-Tکلون و پس از آن در سوش TOP۱۰ باکتری E.coli ترانسفورم شد. سپس ساب کلونینگ ژن ROP۱۳ در پلاسمید بیانی pcDNA۳ انجام شد. هم چنین پلاسمید pcROP۱۳ در سلول یوکاریوتی CHO ترانسفکت شد و به منظور بررسی بیان ژن نوترکیب از روش IFA استفاده شد. یافته ها: با استفاده از روش های PCR، تعیین توالی و روش هضم آنزیمی، کلونینگ ژن ROP۱۳ در پلاسمیدهای بیانی و انتقالی تایید شد. نتایج تعیین توالی ژن کدکننده ROP۱۳ با سویه RH ثبت شده در بانک جهانی ژن تشابه کامل داشت. هم چنین با استفاده از روش IFA، بیان ژن ROP۱۳ در سلول یوکاریوتیک CHO مورد تایید قرار گرفت. استنتاج: نتایج نشان داد که کلونینگ و ترانسفورم قطعه ROP۱۳ در پلاسمید pcDNA۳با موفقیت انجام شده و در سلول یوکاریوتCHO بیان می شود. لذا از این پلاسمید نوترکیب می توان در مطالعات آتی به منظور واکسیناسیون و تشخیص عفونت می توان بهره برد.کلیدواژه ها
toxoplasmosis, Rhoptry ۱۳, pcDNA۳, gene expression, توکسوپلاسموزیس, Rhoptry ۱۳, pcDNA۳, بیان سلولیاطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.