پیشگیری از بیان ژن VEGFR-۱ در محیط کشت، با استفاده از به کارگیری siRNA اختصاصی در درمان نئوواسکولاریزاسیون چشم
- سال انتشار: 1391
- محل انتشار: مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی بیرجند، دوره: 19، شماره: 3
- کد COI اختصاصی: JR_JBUM-19-3_004
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 96
نویسندگان
Biochemistry Department; Chemical Damage Research Center, Baghiyatallah University of Medical Science, Tehran, Iran.
, Immunology Department, torbateheydariyeh university of medical science. Torbateheydariyeh, Iran
Biochemistry Department, Baghiyatallah University of Medical Science, Tehran, Iran
Nano-biotechnology Research Center, Baghiyatallah University of Medical Science, Tehran, Iran
Nano-biotechnology Research Center, Baghiyatallah University of Medical Science, Tehran, Iran.
Nano-biotechnology Research Center, Baghiyatallah University of Medical Science, Tehran, Iran.
Nano-biotechnology Research Center, Baghiyatallah University of Medical Science, Tehran, Iran.
Department of Ophthalmology, Baghiyatallah University of Medical Science, Tehran, Iran.
Nano-biotechnology Research Center, Baghiyatallah University of Medical Science, Tehran, Iran
biochemistry department, torbateheydariyeh university of medical science. Torbateheydariyeh, Iran
Nano-biotechnology Research Center, Baghiyatallah University of Medical Science, Tehran, Iran.
چکیده
زمینه و هدف: آنژیوژنز، از مهمترین فرایندهای زیستی است که هر گونه اختلال در آن، به بیماری منجر می شود. نقطه اصلی در هدایت سیگنالینگ این فرایند، فاکتور رشد اندوتلیال عروقی است که از طریق رسپتورهایش اعمال اثر می کند. مطالعه حاضر، در جهت مهار بیان رسپتور تیپ І این فاکتور (VEGFR-۱)، با استفاده از siRNA اختصاصی در محیط کشت، به منظور استفاده از تاثیر مهاری آن در درمان نئوواسکولاریزاسیون چشم صورت گرفته است. روش تحقیق: در این مطالعه تجربی، ابتدا با استفاده از توالی ژن هدف، توالی های siRNA اختصاصی، علیه آن طراحی، Blast و ساخته شد. از طرف دیگر، cDNA سلولHUVEC، سنتز و ژن هدف، با کمک پرایمر اختصاصیVEGFR۱ و PCR، به میزان مورد نیاز تکثیر شد؛ سپس در وکتور بیانی PEFGP-N۱، کلون و تایید شد. پلاسمید ناقل حاصل، با استفاده از لیپوفکتامین، به سلول Hela که فاقد بیان ژن هدف بود، انتقال داده شد. میزان بیان GFRدر وکتور اولیه و وکتور کلون شده، در حضور و عدم حضور siRNA اختصاصی علیهVEGFR۱ مورد ارزیابی قرار گرفت و میزان مهار ژن، از طریق ارزیابی کاهش فلورسانس سبز رنگ ناشی از GFP، وسترن بلات و RT-PCR مورد بررسی قرار گرفت. نتایج، با استفاده از آزمون تی تست، مورد آنالیز قرار گرفت و ۰۵/۰P< معنی دار در نظر گرفته شد. یافته ها: فلورسانت ناشی از اثر siRNA در گروه هدف در مقایسه با گروه کنترل کاهش داشت SDS Page و وسترن بلاتینگ از سلول حاوی وکتور مواجهه یافته با هر دو نوع siRNA، کاهش میزان پروتئین را نشان داد. نتایج حاصل از دو siRNA به کاررفته، بیانگر کاهش بیان ژن در سطح رونویسی و ترجمه در مقایسه با گروه کنترل بود (۰۵/۰P< ). نتیجه گیری: siRNA اختصاصی طراحی شده علیه VEGFR-۱، با استفاده از لیپوفکتامین، به طور مناسب به داخل سلول منتقل و از بیان رسپتور، به طور معنی دار جلوگیری نمود؛ لذا احتمالا به عنوان یک فاکتور مناسب درمانی جدید، در جلوگیری و یا کاهش نئوواسکولاریزاسیون در چشم، مطرح باشد.کلیدواژه ها
VEGFR-۱, siRNA Neovascularization, HUVEC, RT-PCR, VEGFR-۱, siRNA, نئوواسکولاریزاسیون, HUVEC, RT-PCRاطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.