تولید موتانت غیرسمی توکسین دیفتری در اشرشیاکلی در فرم محلول بر اساس فیوژن با تگ سومو و تنظیم شرایط ابراز ژن

  • سال انتشار: 1402
  • محل انتشار: دهمین همایش ملی مطالعات و تحقیقات نوین درحوزه زیست شناسی و علوم طبیعی ایران
  • کد COI اختصاصی: BSCONF10_070
  • زبان مقاله: فارسی
  • تعداد مشاهده: 225
دانلود فایل این مقاله

نویسندگان

شیرین ترحمجو

استادیار پژوهش، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران

مژگان بنده پور

استاد، مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی و ملکولی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران

محمد آقاابراهیمیان

کارشناس، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران

سلیمه آهنگران

کارشناس، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران

چکیده

پروتئین CRM۱۹۷ موتانت غیر سمی توکسین دیفتری است که بعنوان حامل در ساخت واکسنهای کنژوگه بکار میرود. تولیدتجاری آن در در سویه Corynebacterium diphtheriae C۷(β۱۹۷)(tox) دارای بازدهی پایین است. لذا تولید نوترکیبآن مورد توجه است.اشرشیاکلی میزبان متداول در تولید پروتتین های نوترکیب است اما مشکل آن در ایجاد اینکلوژن بادی است.بنابراین در این مطالعه به بررسی امکان تولید CRM۱۹۷ در اشرشیاکلی در فرم محلول آن پرداخته میشود. برای این منظورپروتئین مذکور بصورت فیوژن با تگهای سومو و هیستیدین با استفاده از وکتور pET۲۸a دز (E. coli BL۲۱(DE۳ بیان شد ودرصد حلالیت پروتئین حاصل با استفاده از SDS-PAGE تعیین شد. نتایج ما نشان دادند که بیان پروتئین در فرم محلول بودهاست و با کاهش دما به ۳۰˚C پروتئین تقریبا بطور کامل محلول بوده است. پس از تخلیص پروتئین با استفاده از تگ هیستیدین وحذف تگ سومو با پروتئاز سومو، پروتئین CRM۱۹۷ حاصل شد که دارای فعالیت نو کلتاز مورد انتظار بوده است. لذا به نظر میرسدروش ارائه شده در این تحقیق برای تولید پروتئین مذکور جهت استفاده های پزشکی مناسب باشد.

کلیدواژه ها

؛CRM۱۹۷، توکسین دیفتری، نوترکیب، حلالیت، پروتئاز سومو، تگ سومو

مقالات مرتبط جدید

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.