مطالعه تاثیر بیش بیان ژن OCT۴ و مهار همزمان ژن P۵۳ بر بیان ژن های پرتوانی در سلول های بنیادی بافت چربی انسان

  • سال انتشار: 1396
  • محل انتشار: دانشور پزشکی (نشریه پژوهشی پایه و بالینی)، دوره: 25، شماره: 6
  • کد COI اختصاصی: JR_DMED-25-6_004
  • زبان مقاله: فارسی
  • تعداد مشاهده: 183
دانلود فایل این مقاله

نویسندگان

عاطفه رشیدی پور

پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، پژوهشکده بیوتکنولوژی پزشکی، گروه سلول های بنیادی و پزشکی بازساختی

آرش جاوری

پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، پژوهشکده بیوتکنولوژی پزشکی، گروه سلول های بنیادی و پزشکی بازساختی

معصومه فخر طه

پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، پژوهشکده بیوتکنولوژی پزشکی، گروه سلول های بنیادی و پزشکی بازساختی

چکیده

مقدمه و هدف: OCT۴ مهمترین فاکتورهای رونویسی درگیر در حفظ پرتوانی و بازبرنامه ریزی سلول های سوماتیک است. از طرفی، مطالعات اخیر نشان داده است که فقدان یا جهش در ژن P۵۳ بازبرنامه ریزی هسته را تسهیل می کند. مطالعه ی حاضر با هدف بازبرنامه ریزی سلول های بنیادی بافت چربی انسانی با استفاده از بیش بیان OCT۴ و کاهش بیان P۵۳ طراحی شد.   مواد و روش ها: سلول های بنیادی بافت چربی با استفاده از آنزیم کلاژناز از نمونه های چربی شکمی بیماران تحت عمل زیبایی ابدومینوپلاستی جداسازی شد. برای شناسایی سلول های بنیادی بافت چربی، بیان مارکرهای مزانشیمی با روش فلوسیتومتری بررسی شد و سلول ها به رده های استخوانی و چربی تمایز داده شدند. سلول های بنیادی بافت چربی در مرحله ی پاساژ سوم با پلاسمید بیانی حامل ژن OCT۴ و shRNA مهارکننده P۵۳ (وکتور pCXLE- hOCT۴/shp۵۳) ترنسفکت شدند. یک هفته پس از ترنسفکشن، بیان ژن های پرتوانی با روش qPCR بررسی شد.   نتایج: سلول های بنیادی بافت چربی در مرحله پاساژ سوم مورفولوژی فیبروبلاست مانند نشان دادند. نشانگرهای مزانشیمی CD۹۰، CD۷۳ و CD۱۰۵ به ترتیب در ۹۴، ۲/۸۰ و ۱/۸۱ درصد از سلول ها بیان شد. به علاوه، سلول های بنیادی بافت چربی به سلول های چربی و استخوانی تمایز یافتند. طبق نتایج qPCR، بیان ژن های OCT۴، SOX۲، LIN۲۸، REX۱، CCND۱ و C-MYC در سلول های ترنسفکت شده با وکتور حامل ژن OCT۴ و shRNA مهارکننده P۵۳ نسبت به گروه کنترل افزایش معنی دار نشان داد.   نتیجه گیری: بیش بیان ژن OCT۴ و مهار بیان P۵۳ به بازبرنامه ریزی سلول های بنیادی بافت چربی به سمت حالت پرتوانی کمک می کند. این روش ممکن است توان تمایزی سلول های بنیادی بافت چربی را برای کاربردهای درمانی افزایش دهد.

کلیدواژه ها

سلول های بنیادی بافت چربی, پرتوانی, OCT۴, shRNA, مهار P۵۳

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.