القا بیان پروتئین نوترکیب DrsB۱-CBDAvr۴ در ریشه های مویین و نا به جا گیاهان تراریخت T۱

  • سال انتشار: 1401
  • محل انتشار: مجله پژوهش های ژنتیک گیاهی، دوره: 9، شماره: 1
  • کد COI اختصاصی: JR_PGRLU-9-1_003
  • زبان مقاله: فارسی
  • تعداد مشاهده: 130
دانلود فایل این مقاله

نویسندگان

میترا خادمی

Production Engineering and Plant Genetics Department, Faculty of Agriculture, Lorestan University, Khorramabad, Iran

مرضیه وارسته شمس

Production Engineering and Plant Genetics Department, Faculty of Agriculture, Lorestan University, Khorramabad, Iran

فرهاد نظریان فیروزآبادی

Production Engineering and Plant Genetics Department, Faculty of Agriculture, Lorestan University, Khorramabad, Iran

چکیده

ریشه ­های مویین و نا به جا برای بیان پروتئین­ های نوترکیب کارآمد هستند. در مطالعه حاضر به بررسی مقایسه میزان پروتئین نوترکیب DrsB۱-CBDAvr۴ در ریشه­ های مویین و نا به جا پرداخته شد. برای این منظور ابتدا، تاثیر عوامل مختلف بر بهینه­ سازی شرایط کشت برای تولید ریشه­ هایی نا به جا و مویین در سه آزمایش جداگانه با ارزیابی تولید زیست ­توده در گیاه تراریخت DrsB۱-CBDAvr۴ مورد بررسی قرار گرفت. صحت تولید ریشه­ های القاء شده توسط اگروباکتریوم رایزوژنز و با آغازگر­های اختصاصی ژن rolC تایید شد. همچنین با استفاده از PCR، ورود ژن­های پپتید نوترکیب درماسپتین B۱ در ژنوم کلون­ های ریشه ­های مویین و نا به جا اثبات شد. سطح پروتئین نوترکیب با استفاده از آنالیز ELISA عصاره­ های کلون ریشه های موئین و نا به جا اندازه­ گیری شد. تجزیه واریانس داده­ های حاصل از تولید و القا ریشه نا به جا نشان داد که بیشترین تعداد و بلندترین طول ریشه در محیط­ های MS حاوی ۱ میلی گرم بر لیتر NAA و ۰.۵ میلی­گرم بر لیتر IBA به­دست آمد. نتایج حاصل از زیست­ توده ریشه نا به جا نشان داد که محیط MS مایع حاوی ۱ میلی­گرم بر لیتر از هورمون NAA روی میزان تولید زیست­ توده اثرات معنی­ داری (P ≤ ۰.۰۱) دارند. بیشترین زیست­ توده در محیط کشت MS حاوی میزان ۱ میلی گرم بر لیتر هورمون NAA به دست آمد و کمترین وزن­ تر و خشک در محیط MS ۱/۴بدون هورمون NAA به­دست آمد. همچنین نتایج این مطالعه نشان داد که سویه ATCC۱۵۸۳۴، در محیط MS همراه با ساکارز ۳ درصد با مدت زمان تلقیح ۱۰ دقیقه بهترین ترکیب تیماری جهت تحریک ریشه مویین در گیاه تراریخت بود. نتایج ELISA نشان داد که کلون­ های به ­دست آمده از هر دو ریشه تفاوت معنی ­داری از نظر میزان غلظت پروتئین کل نشان دادند. میزان پروتئین نوترکیب حاصل از کلون­ های ریشه مویین به مراتب بیشتر از پروتئین ریشه نابه جا بود.

کلیدواژه ها

Recombinant peptides, Growth regulator, Hairy root, Adventitious root, Biomass, پپتید نوترکیب, تنظیم کننده های رشد, ریشه مویین, ریشه نا به جا, زیست توده

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.