تولید گیاه توتون مقاوم به ویروس PVX با استفاده از مکانیسم RNA Silencing
- سال انتشار: 1395
- محل انتشار: پژوهش های کاربردی در گیاه پزشکی، دوره: 5، شماره: 1
- کد COI اختصاصی: JR_ARPP-5-1_008
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 259
نویسندگان
دانشجوی سابق کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی دانشگاه شهید مدنی آذربایجان.
دانشیار گروه بیوتکنولوژی دانشکده کشاورزی دانشگاه شهید مدنی آذربایجان.
دانشیار گروه گیاهپزشکی دانشکده کشاورزی دانشگاه شهید مدنی آذربایجان.
استادیار گروه زیست شناسی گیاهی دانشکده علوم طبیعی دانشگاه تبریز.
چکیده
چکیده یکی از مهمترین ویروسهای بیماریزای خانواده سولاناسه ویروس (PVX)Potato X virus میباشد که سبب ایجاد لکههای موزاییک سیستمیک در توتون (Nicotiana tabacum L.) و خسارت اقتصادی به آن میشود. بهترین روش مدیریت این بیماری استفاده از ارقام مقاوم توتون است. در این تحقیق جهت ایجاد گیاهان توتون مقاوم به PVX ابتدا سازه سنجاقسری قطعهای ۴۰۰ نوکلوتیدی از ژن P۲۵ این ویروس که ممانعت کننده از RNA Silencing در گیاه است، ساخته شد. برای این کار قطعه ژن P۲۵ به روش PCR با آغازگرهای اختصاصی تکثیر و در دو مرحله، در دو جهت سنس و آنتیسنس در ناقل pFGC۵۹۴۱ همسانه سازی شد. در مرحله بعد، سازه RNAi از روی این ناقل نوترکیب به واسطه آگروباکتریوم، به ریزنمونههای (قطعات برگ) گیاهان توتون رقم سامسون انتقال یافت و گیاهان تراریخته با گزینش روی محیط کشت حاوی بستا بدست آمده که پس از تکثیر مورد بررسیهای فنوتیپی و مولکولی قرار گرفتند. بررسی مولکولی با PCR روی DNA گیاهان، وجود تراژن را تایید کرد. نسل بعدی گیاهان تراریخته در گلخانه به روش مکانیکی با PVX تلقیح شدند. نتایج ELISA با آنتیبادی اختصاصی پروتئین پوششیPVX مقاومت سه لاین تراریخته را نشان داد. تایید مولکولی این سه لاین مقاوم توتون به PVX با استفاده از RT-PCR روی RNA استخراج شده از گیاهان بهکمک آغازگرهای CP ویروس انجام شد و ویروس در گیاهان تراریخت ردیابی نگردید. نتیجه این تحقیق منجر به تولید سه لاین مستقل توتون مقاوم به PVX شد که بررسی مقاومت آنها در شرایط مزرعه در حال انجام میباشد.کلیدواژه ها
واژه های کلیدی: توتون, ویروس PVX, مقاومت, گیاه تراریخته, RNA Silencingاطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.