محبوبه شریفی - دانشجوی دکتری گروه گیاه پزشکی دانشگاه گیلان
محمد قدمیاری - دانشیار گروه گیاه پزشکی دانشگاه گیلان
رضا حسن ساجدی - گروه بیوشیمی دانشگاه تربیت مدرس

آنزیم فنل­ اکسیداز (EC ۱.۱۴.۱۸.۱)، یکی از آنزیم­های کلیدی در رشد و ایمنی حشرات می­باشد و مهار این آنزیم می­تواند به­عنوان روشی جدید برای کنترل آفات مورد استفاده قرار گیرد. شب­پره برگ­خوار توت  (Glyphodes pyloalis Walker)، یکی از آفات مهم درختان توت در شمال ایران است که با تغذیه از برگ توت در پرورش کرم ابریشم اختلال ایجاد می­کند. در این تحقیق، آنزیم فنل­اکسیداز از همولمف شب­پره برگ­خوار توت با استفاده از رسوب با سولفات آمونیوم، کروماتوگرافی ژل و کروماتوگرافی تبادل یونی خالص شد. وزن ملکولی دو ایزوفرم آنزیم با استفاده از SDS-PAGE به­ترتیب ۶۹/۶۶ و ۷۰/۵۳ کیلودالتون به­دست آمد. اثرات بازدارنده­ها نشان داد که روش مهارکنندگی ۴-هگزیل رسورسینول از نوع رقابتی و اما برای کوئرسین هیدرات و کوجیک اسید از نوع مختلط می­باشد. هم چنین، بررسی ویژگی­های آنزیمی نشان داد که اسیدیته مطلوب و دمای بهینه آنزیم فنل­اکسیداز به­ترتیب برابر با ۷ و ۳۵ درجه سلسیوس بود و آنزیم در دماهای ۴۰، ۴۵ و ۵۰ درجه سلسیوس تا ۳۰ دقیقه پایدار بود. اثر یون­های فلزی روی آنزیم خالص نشان داد که یون Zn۲+ کاهشی معنی داری بر فعالیت آنزیم داشت.

Glyphodes pyloalis, Phenoloxidase, PURIFICATION, Mechanism of inhibitory