اثر لوواستاتین بر تکثیر سلولی و بیان فاکتور نوروتروفیک سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان در شرایط آزمایشگاهی
عنوان مقاله: اثر لوواستاتین بر تکثیر سلولی و بیان فاکتور نوروتروفیک سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان در شرایط آزمایشگاهی
شناسه ملی مقاله: JR_JCT-13-2_003
منتشر شده در در سال 1401
شناسه ملی مقاله: JR_JCT-13-2_003
منتشر شده در در سال 1401
مشخصات نویسندگان مقاله:
افسانه باقری - دانش آموخته کارشناسی ارشد، گروه زیست شناسی سلولی و مولکولی، دانشکده زیست شناسی، دانشگاه دامغان
محمدتقی قربانیان - دانشیار، گروه زیست شناسی سلولی و مولکولی، دانشکده زیست شناسی، دانشگاه دامغان
ابوطالب کوشا - دانشجوی دکتری و کارشناس گروه زیست شناسی سلولی و مولکولی، دانشکده زیست شناسی، دانشگاه دامغان
خلاصه مقاله:
افسانه باقری - دانش آموخته کارشناسی ارشد، گروه زیست شناسی سلولی و مولکولی، دانشکده زیست شناسی، دانشگاه دامغان
محمدتقی قربانیان - دانشیار، گروه زیست شناسی سلولی و مولکولی، دانشکده زیست شناسی، دانشگاه دامغان
ابوطالب کوشا - دانشجوی دکتری و کارشناس گروه زیست شناسی سلولی و مولکولی، دانشکده زیست شناسی، دانشگاه دامغان
هدف: در سال های اخیر استفاده از سلولهای بنیادی مزانشیمی مشتق از مغز استخوان (BMSCs) در پزشکی بازساختی، مهندسی بافت و ژن درمانی بسیار مورد توجه محققان قرار گرفته است. دسترسی آسان، قابلیت تکثیر و ظرفیت تمایز BMSC بههمراه قابلیت چسبندگی به سطح پلاستیکی و رشد و گسترش در شرایط کشت آزمایشگاهی از ویژگی های این سلول ها به شمار می رود. سلولهای بنیادی مزانشیمی مغز استخوان سلولهای بزرگسالی هستند که توانایی تمایز به دودمان مزودرمی دارند و در میان سایر سلولهای بزرگسال، میتوانند در مهندسی بافت استفاده شوند و کاندیدای مناسبی برای پیوند هستند. داروی لوواستاتین به عنوان یک عامل کاهشدهنده کلسترول و با اثرات آنتیاکسیدانت و به ویژه نوروتروفیک و ضدالتهابی میتواند در درمان اختلالات عصبی موثر واقع شود. هدف از این مطالعه بررسی بقا، تکثیر و بیان ژنهای GDNF و oct۴ با دوزهای مختلف داروی لوواستاتین در سلولهای بنیادی مزانشیمی مغز استخوان است. فرض بر این است که لواستاتین اثرات محافظت کننده عصبی خود را با القای بیان ژن فاکتور نوروتروفیک و ژن فاکتور نسخه برداری تکثیر سلولی اعمال می کند. مواد و روشها: در این مطالعه تجربی از موش صحرایی بالغ نژاد ویستار (wistar) استفاده گردید. در مطالعه حاضر سلولهای بنیادی مزانشیمی از استخوان ران و ساق موش صحرایی استخراج و در محیط α-MEM کشت شد. BMSCsپس از استخراج در محیط α-MEM (Gibco) غنی شده با ۱۰ درصد سرم (Gibco) و پنی سیلین-استرپتومایسین (Gibco) یک درصد در فلاسک ۲۵cm۲ و تراکم ۱۰۴×۲ کشت داده شده و در شرایط دمایی ۳۷ درجه سانتیگراد و CO۲ ۵ درصد نگهداری شدند. سلولهای بنیادی مزانشیمی به مدت ۲۴ ساعت در معرض ۱ میکرومولار، ۵ میکرومولار ، ۱۰ میکرومولار و ۱۵ میکرومولار لوواستاتین بهعنوان تیمار قرار داده شدند. میزان بقا و حیات با روش MTT و تکثیر سلولی با شمارش سلولی توسط رنگآمیزی با DAPI ارزیابی شد. همچنین با روش RT-PCR بیان فاکتور نسخهبرداری تکثیر سلولهای بنیادی Oct۴ و فاکتور نوروتروفیکGDNF بررسی شد. نتایج: سلول های بنیادی مزانشیمی به کف ظرف کشت پلاستیکی چسبیدند و به سرعت تکثیر شدند. در ظرف کشت، این سلول ها معمولا به سه شکل سلولهای کروی کوچک، دوکی شکل و فیبروبلاست مانند ظاهر شدند. نتایج این مطالعه نشان می دهد که میزان تکثیر در غلظت های ۵، ۱۰ و ۱۵ میکرومولار لوواستاتین نسبت به گروه های کنترل افزایش معنی داری را نشان می دهد(۰۵/۰p<). بیان نیمه کمی ژن فاکتورهای نوروتروفیک مشتق از گلیال(GDNF) و ژن های oct۴ نشان داد که بین گروه های تیمار سلول های بنیادی مزانشیمی و گروه کنترل تفاوت معنی داری وجود دارد. بنابراین داروی لوواستاتین موجب افزایش حیات و تکثیر سلولی و همچنین بیان mRNA ژن Oct۴ و GDNF در گروه لوواستاتین نسبت به گروه کنترل، گردید (۰۵/۰p<). نتیجهگیری: بنابراین استفاده از داروی لوواستاتین برای بهبود شرایط کشت سلولهای بنیادی مزانشیمی که برای پیوند و سلول درمانی بهکار میرود، پیشنهاد میشود. نتیجه دیگر این است که سلولهای بنیادی مزانشیمی مشتق از مغز استخوان برای درمان بیماریهای تحلیل برنده مغز (نورودژنرتیو) مفید خواهند بود.
کلمات کلیدی: سلول های بنیادی مزانشیمی, بهبود شرایط کشت, لوو استاتین, نوروتروفین
صفحه اختصاصی مقاله و دریافت فایل کامل: https://civilica.com/doc/1508539/