طراحی روشPCR بهینه شده جهت ردیابی ژن بتالاکتاماز وسیع الطیف نوع SHV

  • سال انتشار: 1395
  • محل انتشار: فصلنامه علوم پیراپزشکی و بهداشت نظامی، دوره: 11، شماره: 2
  • کد COI اختصاصی: JR_JPSMH-11-2_005
  • زبان مقاله: فارسی
  • تعداد مشاهده: 383
دانلود فایل این مقاله

نویسندگان

ندا قراگوزلو حصاری

Islamic Azad University of Qom

کیوان مجیدزاده

Brest Cancer Center (BCRC)

محمد سلیمانی

Islamic Azad University of Qom

چکیده

مقدمه: بتالاکتامازهای وسیع الطیف یکی از عوامل بسیار مهم مقاومت های آنتی بیوتیکی محسوب میشود مقاومت آنتی بیوتیکی در دهه اخیر به عنوان معضل جهانی مطرح گردیده است و دارای آمار مرگ و میر و تلفات بسیاری در سطح جهانی می باشد. بتالاکتامازهای وسیع الطیف یکی از مهمترین نوع شایع در مقاومت آنتی بیوتیکی می باشد.لذا تشخیص سریع و دقیق آن می تواند به منزله گامی بزرگ در حل این مشکل باشد. در این مطالعه هدف بررسی ژن SHV از بتالاکتامازهای وسیع الطیف با تست PCR است. مواد و روشها: ژن SHV از بانک ژنی استخراج و تراز وسط قرار داده شد. پرایمرهای اختصاصی PCR باتوجه به اجماع از ژن SHV طراحی شده بودند. یک پلاسمید حاوی کنترل مثبت ژن با استفاده از PCR و روش شبیه سازی ساخته شده است. ویژگی آزمایش با استفاده از DNA بروسلا ژنومی و یک پنل متشکل از ژنوم های موجودات ۱۰ گرم مثبت و ۱۰ گرم منفی مورد بررسی قرار گرفت. تست PCR با محصولات بسیار خاص و بدون محصولات تقویت کننده از ارگانیسم غیر SHV مشاهده شد. تست های دیگر از این ویژگی نیز با استفاده از CTX-M و بتالاکتاماز TEM مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج: در الکتروفورز محصول PCR باندی به طول bp۱۹۹ مطابق با طول توالی مدنظر رویت شد. نمایش قطعه مشابه در PCR پلاسمید نوترکیب محصول شبیه سازی شده حاوی ژن SHV را تایید می کند. زمانی که پلاسمید بر PCR –SHV قرار گرفت، یک الگوی نردبانی بر روی ژل آگارز مشاهده شد. الگو هرگز در گروه کنترل مشاهده نشد. نتایج حاصل از آزمایش نشان داد که آغازگر به طور جداگانه برای ژن SHV بود. بحث و نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشانگر این موضوع بود که تست PCR طراحی شده روشی آسان، سریع و ارزان در بررسی بتالاکتاماز وسیع الطیف نوع SHV میباشد.

کلیدواژه ها

Betalactamases, SHV, PCR, بتالاکتاماز وسیع الطیف, SHV, PCR

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.