مطالعه وطراحی روش تشخیص سریع ویبریوکلرا با ایجادکمپلکس کوآگلوتیناسیون با استفاده از استافیلوکوکوس اورئوس واجد پروتئین A

 مقدمه: ویبریوکلرا باکتری بیماریزا گرم منفی است که عامل وبا بیماری اسهال کشنده است. وبا عمدتا در ماه ­های گرم، وقتی باکتری بتواند در آب آلوده به مدفوع به سرعت تکثیر کند مشاهده می ­گردد. این بیماری یک نوع اسهال شدید است که در طی قرن ­ها به شدت وضعیت بهداشت و اقتصاد جوامع مبتلا را تحت تاثیر قرار می­ دهد. طراحی و ارائه یک روش سریع و قابل اعتماد برای شناسایی ویبریوکلرا به عنوان یک بیماری مسری و باکتری سریع شد و قابل انتقال یکی از چالش های این دهه می باشد. مواد و روش ها: خرگوش ­های سفید نیوزیلندی با سلول کامل ویبریوکلرا اگاوا و اینابا ایمن شدند. گاماگلوبین ­های به ­دست آمده از سرم تام در مرحله اول توسط ترسیب سولفات ­آمونیوم تخلیص و تغلیظ گردید و سپس خلوصاین پادگن ها با به کارگیری کروماتوگرافی میلی ترکیبی در مرحله بعد افزایش یافت. .این آنتی­ بادی­ ها به سلول ­های کامل استافیلوکوکوس اورئوس cowan ۱ NCTC-۸۳۲۵ متصل گردید. نمونه ­های سواب رکتال به یک محیط آب پپتونه قلیایی(pH ۸.۶) غنی شده تلقیح گردید و به مدت ۵ ساعت در دمای ۳۷ درجه قرار گرفتند. یک قطره از هر نمونه را با یک قطره از کمپلکس کوآگلوتیناسیون ویبریوکلرا مخلوط و نتایج در عرض ۳-۲ دقیقه گزارش گردید. یافته های پژوهش: نتایج حاصل از اندازه گیری حساسیت، ویژگی و دقت آزمون طراحی شده در مقایسه با روش کشت استاندارد به ترتیب برابر ۹۷، ۹۹ و ۹۸ درصد حاصل گردید که به عنوان یک روش سریع و قابل اعتماد جهت به کارگیری در شیوع اندمیک یا همه گیر بیماری کشنده و قابل انتقال وبا روش کارآمدی به حساب می آید. بحث و نتیجه گیری: روش کوآگلوتیناسیون طراحی شده در این پژوهش یک روش ساده، سریع و قابل اعتماد برای تشخیص ویبریوکلرا در نمونه مدفوع می باشد که می تواند در شناسایی سریع و کنترل موارد اسهال شدید حاصل از بیماری وبا به­ خصوص در زمان همه گیری در مناطق با امکانات آزمایشگاهی حداقل مورد استفاده قرار گیرد و مانع شیوع و مرگ و میر توسط این بیماری مسری گردد.  

کلیدواژه ها:

Coagglutination ، Complex coagglutination ، Protein A ، Staphylococcus aureus ، Vibrio cholera ، کمپلکس کواگلوتیناسیون ، پروتئین A ، استافیلوکوکوس اورئوس ، ویبریوکلرا ، کوآگلوتیناسیون