ترانسفورماسیون برنج (Oryza sativa L.) با ژن های گزینشگر هایگرومایسین (hpt) و گزارشگر بتاگلوکورونیداز (gus) به روش In planta
- سال انتشار: 1391
- محل انتشار: فصلنامه تحقیقات غلات، دوره: 2، شماره: 1
- کد COI اختصاصی: JR_CRGU-2-1_004
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 156
نویسندگان
دانشجوی سابق کارشناسی ارشد گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده علوم کشاورزی دانشگاه گیلان
دانشجوی سابق کارشناسی ارشد گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده علوم کشاورزی دانشگاه گیلان
استادیار گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده علوم کشاورزی دانشگاه گیلان
استادیار گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده علوم کشاورزی دانشگاه گیلان
چکیده
گیاهان تراریخته اغلب به وسیله روشهایی بر پایه کشت بافت تولید میشوند که روشهای پیچیدهای بوده و نیاز به آماده سازی و انتخاب دقیق ریزنمونه، انتخاب بافتهای تراریخت شده و باززایی گیاهان تراریخته در شرایط in vitro را دارند. در این آزمایش، گیاهان تراریخته در شرایط غیر استریل تولید شدند. بدین منظور بذور دو رقم برنج بومی تیپ ایندیکا خیسانده شدند تا جنین فعال و شروع به رشد کند. سپس منطقه جنینی با حداقل آسیب به جنین زخم زنی و با دو سویه اگروباکتریوم تومه فاشیینس (Agrobacterium tumefaciens) حامل ناقل pCAMBIA۱۱۰۵. ۱R تلقیح شدند. القاء ژن های vir در محیط کشت خاصی که بدین منظور طراحی شده است انجام شد. بذور بعدا جوانه زده و در تحت شرایط غیر استریل رشد کردند. تایید الحاق ژن انتقالی به درون ژنوم گیاهان تراریخته نسل T۰ و T۱ با استفاده از روش PCR شامل دو ژن در داخل منطقه T-DNA، مقاومت بافت برگی به آنتی بیوتیک هایگرومایسین و آزمون بافت شیمیایی GUS انجام شد. بیشترین کارایی ترانسفورماسیون در نسل T۰مربوط به تیمار زخم زنی به وسیله خراش با اسکالپل آغشته به اگروباکتریوم به میزان ۷۲/۱۱ درصد در رقم هاشمی ۷۵/۹ درصد بوده است. کارایی ترانسفورماسیون در رقم هاشمی در شرایط سوزن زنی همراه با خلاء نیز به طور معنی داری از تلقیح تحت شرایط غیرخلاء بیشتر بوده است. به منظور بررسی پایداری ژن تراریخته گیاهان نسل T۱به طریق مشابهنسل T۰ آنالیز مولکولی شده و نتایج نشان داد که همچنان ۱۹ درصد گیاهان نسل T۱تراریخت بوده اند.کلیدواژه ها
استوسیرینگون, القاء ژن های vir, برنج, ژن های گزینشگر و گزارشگر, Agrobacterium tumefaciensاطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.