بهینه سازی بیان موقت ژن به واسطه آگروباکتریوم (Agroinfiltration) در برگ و جوانه گیاه جو (Hordeum vulgare L.)
- سال انتشار: 1398
- محل انتشار: فصلنامه تحقیقات غلات، دوره: 9، شماره: 1
- کد COI اختصاصی: JR_CRGU-9-1_006
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 256
نویسندگان
استادیار، گروه زیست فرآورده های گیاهی، پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران
دانش آموخته کارشناسی ارشد، گروه زیست فرآورده های گیاهی، پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران
استادیار، گروه زیست فرآورده های گیاهی، پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران
چکیده
جو (Hordeum vulgare L.) یکی از مهمترین گیاهان زراعی در دنیا است و بهعنوان یک سامانه تولید پروتئینهای نوترکیب نیز در بیوتکنولوژی کشاورزی اهمیت یافته است. در گیاهانی مانند غلات که باززایی و تراریختی آنها مشکل است، در برخی موارد بیان موقت یا گذرای ژن بهعنوان جایگزینی برای روش پایدار در نظر گرفته میشود. بیان موقت ژن توسط آگروباکتریوم (Agroinfiltration)، روشی ارزان و سریع برای بررسی عملکرد ژنها و بررسی عملکرد عناصر موثر بر بیان ژن (نواحی ترجمه نشونده، اینترونها، عوامل رونویسی و پروموترها) است. با استفاده از این روش، بررسی نحوه کارکرد سازه ژنی فقط با گذشت چند روز و بدون پشت سر گذاردن مراحل وقت گیر باززایی گیاه امکانپذیر است. بهمنظور بهینهسازی این روش در گیاه جو، اثر تیمارهای مختلف مانند نوع بافت، سن گیاه، محل برگ، غلظت استوسیرینگون، زمان بررسی پس از تلقیح، سویه آگروباکتریوم، غلظت (OD) محیط القا، نوع روش، مدت زمان فعالیت پمپ خلا و تعداد آن و نیز ژنوتیپ بر بیان موقت ژن گزارشگر ß-glucuronidaseدر برگ گیاه جو در این تحقیق بررسی شد. علاوه بر آن، اثر محیط القا، سویه آگروباکتریوم و ژنوتیپ بر بیان موقت ژن گزارشگر در جوانه گیاه جو نیز مورد مطالعه قرار گرفت. بیان موقت ژن ß-glucuronidase در تمامی نمونههای جوانه رقم بهمن و ژنوتیپ EC-۸۲-۶ گیاه جو که با سویه GV۳۳۰۱ آگروباکتریوم واجد این سازه در محیط القا با غلظت استوسیرینگون ۲۰۰ میکرومولار بهوسیله سوزن انسولین تلقیح شده بودند، مشاهده شد. بر اساس نتایج این تحقیق، یک روشی کارا و ارزان قیمت برای بیان موقت در گیاه جو با استفاده از آگروباکتریوم معرفی می شود.کلیدواژه ها
انتقال ژن, ژن گزارشگر, عوامل رونویسیاطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.