جداسازی و کلونینگ ژن ایزوفلاون سنتتاز از گیاه سویا رقم ویلیامز III

  • سال انتشار: 1395
  • محل انتشار: پژوهشنامه اصلاح گیاهان زراعی، دوره: 8، شماره: 17
  • کد COI اختصاصی: JR_JCB-8-17_017
  • زبان مقاله: فارسی
  • تعداد مشاهده: 370
دانلود فایل این مقاله

نویسندگان

امیر آراسته فر

علی ریاحی مدوار

مسعود توحیدفر

چکیده

     ایزوفلاونوییدها، دسته­ای از ترکیبات فلاونوییدی هستند که با استفاده از آنزیم ایزوفلاون سنتاز از پیش­ماده فلاوانونی در گیاهان لگوم تولید می­شوند. مهم­ترین ایزوفلاون­های موجود در گیاه سویا شامل: جنیستین و دیدزین می­باشند که خواص دارویی زیادی دارند. تحقیقات نشان می­دهد که مصرف مرتب این ترکیبات خطر ابتلا به سرطان­های وابسته به هورمون­های جنسی را کاهش داده و کاهش علایم یائسگی، پوکی استخوان، تعدیل کلسترول خون، بهبود بیمای­های کرونری قلبی و غیره همگی از مزایای استفاده از این ترکیبات می­باشد. در این پژوهش به­منظور جداسازی ژن ۲- هیدروکسی ایزوفلاوانون سنتاز (IFS) ابتدا RNA کل از سویا جداسازی شده و کتاب­خانه cDNA ساخته شد. ژن  IFSبا پرایمرهای اختصاصی با مکان­های برشی HindIII و XbaI از طریق PCR تکثیر گردید و سپس ژن تکثیر شده با اندازه ۱۵۶۶ جفت بازی پس از خالص­سازی از روی ژل در مکان XbaI/HindIII در ناقل بیانی pET۲۸a+ کلون­ شد. سپس پلاسمید نو­ترکیب به استرینXLI-Blue  باکتری E. coli منتقل گردید. وجود ژن IFS در پلاسمید­های نوترکیب با دو روش PCR و هضم آنزیمی مورد تائید قرار گرفت. در نهایت، حامل مذکور را می­توان برای بیان در داخل پروکاریوت یا با سابکلون کردن مجدد برای انتقال ژن به گیاهان مختلف با روش اگروباکتریوم و تفنگ ژنی مورد استفاده قرار داد.

کلیدواژه ها

Cloning, Genistein, IFS Gene, Isoflavonoid Compounds, Medicinal Impacts, Soybean, ترکیبات ایزوفلاونوییدی, جنیستین, کلونینگ, اثرات دارویی, ژن IFS, سویا

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.