شناسایی عملکرد پپتید ضدمیکروبی استخراج شده از همولنف سوسک Tenebrio molitor
- سال انتشار: 1399
- محل انتشار: بیست و یکمین کنگره ملی و نهمین کنگره بین المللی زیست شناسی ایران
- کد COI اختصاصی: BIOCONF21_0349
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 369
نویسندگان
گروه زیست فناوری، دانشکده زیست فناوری، دانشگاه سمنان، سمنان، ایران
گروه زیست شناسی،دانشکده زیست سناسی، دانشگاه سمنان، سمنان، ایران
گروه زیست فناوری، دانشکده زیست فناوری، دانشگاه سمنان، سمنان، ایران،
چکیده
پپتیدهای ضدمیکروبی حشرات، متعلق به سیستم ایمنی ذاتی است که در توده چربی آنها تولید و به درون همولنف ترشح میشوند. هدف از این پژوهش جداسازی و تخلیص پروتئین مورد نظر از همولنف و بررسی دامنه عملکردن پپتید میباشد. برای افزایش میزان تحریک سیستم ایمنی حشرات و افزایش بیان پپتیدهای ضدمیکروبی، سوسپانسیون باکتری (ATCC۲۵۹۲۲) Escherichia coli با غلظت ۱۰۸ cfu/ml به مدت ۲۰ دقیقه جوشانیده، و پس از دوبار شستوشو با بافر PBS، از این سوسپانسیون به ۳۰ لارو Tenebrio molitor، هر لارو غلظتی معادل ۱۰۵ cfu/ml و همان حجم بافر به ۱۰ لارو به عنوان کنترل PBS باکمک سرنگ G۳۰ تلقیح گردید، در زمان تزریق و هنگام استخراج همولنف، لاروها به وسیله سرما و اتر غیرفعال شدند، ۱۸ و ۳۲ ساعت پس از تزریق با جداسازی سر حشرات، همولنف در تیوبهای سرد حاوی بافر ضدانعقاد استخراج شد. پس از سانتریفیوژ و رسوب گیری در شرایط ۱۰۰۰۰rpm، دمای ۴ درجه سانتیگراد، به مدت۳۰ دقیقه ۳) تا ۴ بار) همولنف از سایر اجزای سلول جدا شده و با استفاده از SDS-PAGE ۱۲% الگوی پروتئینهای موجود در همولنف حشرات آلوده با کنترل مقایسه گردید. برای بررسی ماهیت ضدباکتریایی همولنف با روش انتشار در آگار، ۵۰ ʽl همولنف حشرات کنترل و آلوده در درون چاهک با قطر ۵ میلیمتر برروی پلیت نوترینت آگار حاوی E. coli ۱۰۵ cfu/ml و Staphylococcus aureus (ATCC۲۵۹۲۳) افزوده و قطر هاله عدم رشد پس از ۱۴ ساعت گرماگذاری، اندازگیری شد. تفاوت در میزان قطر باند ۳۰ kDa نسبت به کنترل پس از ۳۲ ساعت آلودگی مشاهده شد. قطر هاله عدم رشد برای هر دو باکتری در حدود ۱۴ میلی متر نسبت به کنترل تزریق (PBS) افزایش داشت. مراحل تخلیص و جداسازی هر پروتئین از مجموعه پروتئینها با هدف مقایسه این عملکرد در حشرات بومی سمنان در حال اجرا میباشد.کلیدواژه ها
پپتید های ضدمیکروبی، Tenebrio molitor، همولنفمقالات مرتبط جدید
- تولید آنتی بادی پلی کلونال مونواسپسیفیک جهت شناسایی باکتریهای جنس سالمونلا
- بررسی فراوانی سویه های مدرن و اجدادی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس بر اساس نشانگر TbD۱ در شمال غرب ایران
- The impact of the gut microbiome on metabolic, psychiatric, and immune diseases
- پیشگیری از سرطان خون سفری به سوی زندگی سالمتر
- Investigating the Effect of Pulegone and Neomenthol Compounds in Cancer Inhibition Using Molecular Docking
اطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.