بررسی پایداری انزیم پراکسیداز گیاهی لیپیدیوم درابا در pH های مختلف
- سال انتشار: 1399
- محل انتشار: بیست و یکمین کنگره ملی و نهمین کنگره بین المللی زیست شناسی ایران
- کد COI اختصاصی: BIOCONF21_0132
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 362
نویسندگان
گروه بیوتکنولوژی، پژوهشکده علوم محیطی، پژوهشگاه علوم و تکنولوژی پیشرفته و علوم محیطی، دانشگاه تحصیلات تکمیلی صنعتی و فناوری پیشرفته، کرمان، ایران
گروه زیست شناسی سلولی و مولکولی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه کوثر بجنورد، بجنورد، ایران
گروه بیوتکنولوژی، پژوهشکده علوم محیطی، پژوهشگاه علوم و تکنولوژی پیشرفته و علوم محیطی، دانشگاه تحصیلات تکمیلی صنعتی و فناوری پیشرفته، کرمان، ایران،
گروه بیوتکنولوژی، پژوهشکده علوم محیطی، پژوهشگاه علوم و تکنولوژی پیشرفته و علوم محیطی، دانشگاه تحصیلات تکمیلی صنعتی و فناوری پیشرفته، کرمان، ایران،
چکیده
پراکسیدازها (EC ۱.۱۱..۱.۷) اکسیدوردوکتازهایی هستند که کاهش پراکسیدها مانند پراکسید هیدروژن (H۲O۲) و اکسیداسیون انواع ترکیبات آلی و غیرآلی را کاتالیز میکنند. بیشترین کاربردهای تجاری پراکسیدها در تشخیص های تحلیلی مانند حسگرهای زیستی و سنجش ایمنی میباشد. هدف اصلی در این تحقیق، بررسی پایداری آنزیم پراکسیداز گیاهی لیپیدیوم درابا (LDP) در حضور pH های مختلف میباشد. در این پژوهش، پس از کشت باکتری حاوی وکتور pET۲۸a که حامل ژن پراکسیداز گیاهی LDP میباشند با استفاده از القا کننده IPTG افزایش بیان به مدت ۴ ساعت در دمای ۱۸œC انجام گرفت. تخلیص پروتئین با استفاده از ستون کروماتوگرافی میل ترکیبی Ni-NTA، و با استفاده از بافر حاوی ایمیدازول انجام شد. خلوص پروتئین با استفاده از ژل الکتروفورزSDS-PAGE و غلظت آن با استفاده از روش برادفورد اندازه گیری و فعالیت آن در حضور سوبسترای TMB و H۲O۲ در طول موج ۶۵۳ نانومتر با استفاده از دستگاه اسپکتروفتومتر اندازه گیری شد. سپس فعالیت آنزیم در pH مختلف (۹-۵) با سه بار تکرار اندازه گیری شد. نتایج حاصل از ژل الکتروفورز نشان داد که پروتئین با درجه خلوص بالا تخلیص شده و بیشترین فعالیت را در رنج ۶ pH تا ۶/۵ دارد و در pH های کمتر و همچنین pH های خنثی و بازی فعالیت آن کاهش مییابد. بنابراین پیشنهاد میشود جهت استفاده از این آنزیم در pHهای دیگر، از روشهایی مثل جهش زایی جهت افزایش پایداری آن استفاده شود.کلیدواژه ها
اکسیدوردوکتاز، تخلیص، الکتروفورزمقالات مرتبط جدید
- مروری بر نقش گیاه آرتمیزیا (Artemisia annua) در درمان مالاریا از طب سنتی تا طب جدید
- مروری بر گیاهان دارویی ایران با بیشترین همپوشانی مواد موثره جهت توسعه درمانهای ترکیبی
- اسفرزه (Plantago ovata Forsk) موثر در درمان کولیک شنی در اسب
- تحلیل عوامل موثر بر کاربرد گیاهان دارویی در درمان بیماری کووید-۱۹
- تاثیر روشهای خشک کردن بر کمیت و کیفیت اسانس گیاه دارویی گزنه
اطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.