بررسی پلی مورفیسم ژن BMP۱۵ در مرغ بومی استان آذربایجان غربی

هدف از پژوهش حاضر، بررسی چندشکلی ژن BMP۱۵ و ارتباط آن با صفات تولید تخم مرغ در مرغ بومی آذربایجان غربی با روش PCR-SSCPبود. برای این منظور از ۱۸۰ قطعه مرغ بومی مرکز اصلاح نژاد مرغ بومی آذربایجان غربی، خون گیری انجام شد. برای خون گیری از ونوجکتهای حاوی EDTA برای جلوگیری از انعقاد خون، استفاده شد. بعد از خون گیری، نمونه ها به آزمایشگاه گروه علوم دامی انتقال یافت و تا استخراج DNA در دمای ۲۰- درجه نگهداری شد. استخراج DNA با استفاده از روش بهینه یافته نمکی صورت گرفت. کمیت و کیفیت DNA استخراجی به وسیله اسپکتوفتومتری و ژل آگارز یک درصد تعیین شد. برای انجام واکنش زنجیره ای پلیمراز ابتدا طراحی پرایمرهای اختصاصی جهت تکثیر قطعه ۴۱۸ جفت بازی ژن BMP۱۵ با استفاده از نرم افزار Primer۳Plus انجام گرفت. قطعه مورد نظر به خوبی تکثیر یافت. روش تفاوت فرم فضایی رشته های منفرد (SSCP) جهت شناسایی چندشکلی در نمونه ها مورد استفاده قرار گرفت. الکتروفورز عمودی نمونه ها روی ژل پلی آکریل آمید ۱۲٪ به مدت ۲۴ ساعت با ولتاژ ۲۸۰ در دمای ۴ درجه سانتیگراد انجام گرفت. برای رنگ آمیزی ژل پلی اکریل آمید از نیترات نقره استفاده شد. نوارهای تشکیل شده بر روی ژل پلی اکریل آمید شکل یکسان را نشان دادند و حاکی از مونومورف بودن این جایگاه از ژن BMP۱۵ بود.

کلیدواژه ها:

پلی مورفیسم ، ژن BMP۱۵ ، مرغ بومی ، تولید تخم ، PCR-SSCP