بررسی اثرات درمانی حذف lncRNA NEAT۱ و القای آپوپتوز در رده سلولی سرطان پروستات با استفاده از CRISPR/Cas۹
- سال انتشار: 1400
- محل انتشار: مجله پزشکی بالینی ابن سینا، دوره: 28، شماره: 1
- کد COI اختصاصی: JR_SJH-28-1_007
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 490
نویسندگان
PhD Student in Molecular Genetics, Department of Biology, Faculty of Basic Sciences, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran
Associate Professor, Biotechnology Research Center, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran
Assistant Professor, Department of Molecular Medicine, Faculty of Advanced Technologies in Medicine, Iran University of Medical Sciences, Tehran, Iran
چکیده
سابقه و هدف: lncRNA (Long non-coding ribonucleic acid) به عنوان کنترل کننده اساسی ژن ها و مارکرهای پیش آگهی در سرطان های مختلف شناسایی شده است. در این مطالعه، اثر تخریب NEAT۱ lncRNA (Nuclear Paraspeckle Assembly Transcript ۱) با استفاده از سیستم CRISPR/Cas۹ (Clustered regularly interspaced short palindromic repeats/ CRISPR associated protein ۹) در رده سلولی PC-۳ مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، پلاسمیدهای نوترکیب حامل sgRNA (Single guide RNA) در سیستم CRISPR طراحی و ساخته شدند. سلول های رده سرطان پروستات PC-۳ با وکتورهای نوترکیب، ترانسفکت شده و میزان بیان ژن های مرتبط با آپوپتوز با استفاده از روش q-PCR (Quantitative polymerase chain reaction) سنجیده شد. از آزمون های انکسین، MTT و خراش سلولی به ترتیب برای بررسی فعالیت های آپوپتوزی، زیستایی و تکثیر سلولی و مهاجرت سلولی استفاده گردید. یافته ها: تخریب ژن NEAT۱ با روش CRISPR/Cas۹ سبب تغییرات محسوس در بیان ژن های مرتبط با آپوپتوز گردید؛ به طوری که بیان ژن های P۲۱، BCL۲ و BIRC۵ کاهش یافت و بیان P۵۳ و BAX افزایش پیدا کرد. علاوه براین در سلول های گروه تیمار، میزان تکثیر و مهاجرت سلولی نسبت به گروه کنترل کاسته شد. افزایش آپوپتوز در سلول های ویرایش ژن شده نسبت به گروه کنترل مشاهده گردید. نتیجه گیری: NEAT۱ به عنوان یک انکوژن، نقش مهمی در تومورزایی دارد و تخریب آن سبب کاهش بقا و مهاجرت سلولی و نیز افزایش آپوپتوز سلول های سرطانی می شود.کلیدواژه ها
CRISPR-Associated Protein ۹, NEAT۱ Long Non-coding RNA, Prostatic Neoplasms, PC-۳ Cells, ژن NEAT۱, سرطان پروستات, سلول های PC-۳, کریسپر Cas۹اطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.