Cloning and Expression of Bst DNA Polymerase I Gene in E. coli BL۲۱
- سال انتشار: 1398
- محل انتشار: فصلنامه زیست شناسی میکروارگانیسمها، دوره: 8، شماره: 32
- کد COI اختصاصی: JR_BJM-8-32_004
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 415
نویسندگان
گروه بیوتکنولوژی، دانشکده علوم زیستی ،دانشگاه الزهراس،تهران ،ایران
گروه بیوتکنولوژی- دانشکده علوم زیستی- دانشگاه الزهرا- تهران- ایران
گروه بیوتکنولوژی- دانشکده علوم زیستی- دانشگاه الزهرا- تهران- ایران
چکیده
خلاصه DNA پلیمرازها علاوه بر کاربردشان در همسانه سازی و تصحیح ، در انواع تکنیک های ملکولی مانند تکثیر DNA ، جهش های نقطه ای ، توالی یابی DNA ، انواع مختلف PCR ، LAMP و ...اهمیت دارند. پس از کشف PCR تلاش هایی مبنی بر تشخیص و جداسازی آنزیم های مقاوم به دماهای بالا که توانایی تکثیر موثر DNA در دماهای بالا انجام گرفت. در این پژوهش ، سویه Geobacillus stearothermophilus strain ۱۰ به منظور همسانه سازی ژن رمزگذار Bst DNA Polymerase استفاده گردید. پس از استخراج DNA باکتری ، ژن مورد نظر با استفاده از پرایمر های طراحی شده و با روش PCR تکثیرگردید. همسانه سازی ژن رمزگذار آنزیم در ناقل بیانی pET۳۲a و انتقال آن در باکتری E.coli BL۲۱ صورت گرفت. پس از بیان ژن در میزبان با استفاده از IPTG، پروتئین حاصل با استفاده از ستون های IMAC خالص سازی گردید . برای تعیین کیفی فعالیت، آنزیم نوترکیب در واکنش LAMP به کار گرفته شد. نتایج نشان می دهد آنزیم Bst Polymerase می تواند جایگزین مناسبی برای نوع وارداتی آن باشد. کلمات کلیدی: Bst DNA polymerase ، همسانه سازی، بیان ژن، LAMP, PCRکلیدواژه ها
Bst DNA polymerase, همسانه سازی, بیان ژن, LAMP, PCRاطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.