جداسازی، شناسایی و تعیین هویت مولکولی گونههای کریپتوسپوریدیوم در اسهال گوسالهها به روش multiplex nested-PCR

  • سال انتشار: 1399
  • محل انتشار: فصلنامه تحقیقات دامپزشکی، دوره: 75، شماره: 3
  • کد COI اختصاصی: JR_JVR-75-3_002
  • زبان مقاله: فارسی
  • تعداد مشاهده: 519
دانلود فایل این مقاله

نویسندگان

وحید نصیری

آزمایشگاه تک یاختهشناسی، بخش تحقیق و تشخیص بیماریهای انگلی، موسسه تحقیقات واکسن و سرمسازی رازی کرج، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران

فرنوش جامعی

آزمایشگاه تک یاختهشناسی، بخش تحقیق و تشخیص بیماریهای انگلی، موسسه تحقیقات واکسن و سرمسازی رازی کرج، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران

حبیب اله پایکاری

آزمایشگاه تک یاختهشناسی، بخش تحقیق و تشخیص بیماریهای انگلی، موسسه تحقیقات واکسن و سرمسازی رازی کرج، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران

چکیده

زمینه مطالعه: تشخیص گونه­های کریپتوسپوریدیوم براساس خصوصیات مورفولوژی بسیار محدود بوده و به تنهایی فاقد ارزش تاکسونومیک است، و لذا استفاده از روش­های مولکولی این محدودیت­ها را تا حدودی برطرف می­سازد. هدف: هدف از این مطالعه تعیین ژنوتیپ­های غالب کریپتوسپوریدیوم در گوساله­های مبتلا به اسهال بود. روش کار: مطالعه در گوسالههای کمتر از ۳ ماه و برای مدت ۲ سال انجام شد. در طول دوره مطالعه، ۱۶۰ نمونه مدفوع از گوسالههای جوان جمعآوری شده و ابتدا از طریق میکروسکوپی و سپس با استفاده از تکنیکهای مولکولی مورد بررسی قرار گرفت. مدفوع از جهت حضور اواوسیستهای کریپتوسپوریدیوم توسط روش شناورسازی با آب شکر شیتر و به دنبال آن روش رنگآمیزی ذیل نلسون  مورد بررسی قرار گرفت. دی ان آ انگل استخراج و پروتکل multiplex nested-PCR براساس ژن ۱۸srRNA جهت شناسایی سه گونه سازگار در گاو (یعنی کریپتوسپوریدیوم اندرسونی،  کریپتوسپوریدیوم بوویس و کریپتوسپوریدیوم رایانه) به علاوه گونه مشترک بین انسان و دام یعنی کریپتوسپوریدیوم پارووم انجام شد. نتایج: ۱۱۰ نمونه مدفوع از دامداری­های موجود در استان البرز و ۵۰ نمونه مدفوع نیز از دامداری­های شهر شاهرود جمع­آوری گردید. از ۱۶۰راس حیوان مورد آزمایش ۹۰ راس ماده و ۷۰ راس نر بودند. در مجموع در میان ۱۶۰ راس دام مورد آزمایش ۸۵ مورد (۱۲/۵۳ درصد) مبتلا به اسهال بودند که ۵۵ مورد (۳۷/۳۴درصد) از این تعداد حیوان تحت آزمایش با استفاده از رنگآمیزی ذیل نلسون مثبت تشخیص داده شدند. از آنجاییکه تمام موارد مثبت مربوط به نمونه­های اسهالی و مرتبط با گوساله­های زیر یک ماه بود، ارتباط معنی­داری مابین وضعیت اسهال و حضور این انگل مشاهده گردید (۰۵/۰p < ). از نظر توزیع فصلی تفاوتی در میزان موارد اسهالی و موارد مثبت انگلی مشاهده نشد. حضور باند ۳۰۵ جفت بازی در کلیه نمونه­های مثبت ذیل نلسون موید حضور گونه کریپتوسپوریدیوم پارووم در تمامی نمونه­ها بود. نتیجهگیری نهایی: گوساله­های شیرخوار بیشتر با کریپتوسپوریدیومپارووم آلوده می­شوند که تحقیق حاضر نیز موید این مطلب بود.

کلیدواژه ها

انگل روده ای, کریپتوسپوریدیوم, گوساله, اسهال, جداسازی مولکولی

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.