بهینه سازی بیان و تخلیص آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز از باکتری هالوترموتولرانت Bacillus licheniformis SL-1
- سال انتشار: 1398
- محل انتشار: مجله تازه های بیوتکنولوژی سلولی – مولکولی، دوره: 9، شماره: 34
- کد COI اختصاصی: JR_NCMBJ-9-34_002
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 357
نویسندگان
Department of Technical and Engineering ۲, Islamic Azad University of Tabriz, Tabriz, Iran
Biotechnology Research Center, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran.
Department of Microbiology and Immunology, Faculty of Medicine, Kashan University of Medical Sciences, Kashan, Iran
School of Pharmacy, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran.
School of Pharmacy, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran.
چکیده
سابقه و هدف: آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز (EC 3.4.21.19) متعلقبه خانواده سرین پروتئازها است. این آنزیم میتواند با هیدرولیز اختصاصی پیوندهای پپتیدی در آنالیز ساختار پروتئین، سنتز پپتیدها به روش فاز جامد و تهیه نانوتیوبها مورد استفاده قرار گیرد. هدف از این مطالعه تولید آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز باکتری Bacillus licheniformis SL-1 مقاومبه حرارت که بومی ایران است است. مواد و روشها: در این مطالعه بیان آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز از باکتری Bacillus licheniformis SL-1 در E. coli BL21 i بهصورت پریپلاسمی در دماهای ۱۶، ۲۰ و ۳۷ درجه سانتیگراد و غلظتهای 4/0، ۱ و ۲ میلیمولار القاگر بهینه سازی شد. با توجهبه اینکه آنزیم نوترکیب تولید شده دارای دنباله هیستیدینی (His-tag) است از ستون نیکل سفارز برای تخلیص به روش کروماتوگرافی تمایلی استفاده گردید. یافته ها: شرایط مختلف برای بیان آنزیم نوترکیب گلوتامات اندوپپتیداز بررسی گردید و بهترین نتایج برای بیان پری پلاسمیک و محلول آنزیم در میزبان E. coli BL21 در دمای ۳۷ درجه سانتیگراد با غلظت ۲ میلیمولار IPTG بهدست آمد. نتیجه گیری: بررسی کیفی نتایج حاصل از بیان آنزیم تحت شرایط مختلف حاکی از آنستکه بیان پروتئین نوترکیب وابستهبه دما بوده و نیازمند غلظتهای بالای القاگرIPTG است. مطالعه حاضر نتایج اولیه بررسی امکان تولید نوترکیب آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز در سیستم بیانی E. coli BL21 است. برای تولید هر چه بهتر آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز سایر پارامترهای مؤثر مانند سیستمهای بیانی و روشهای تخلیص جایگزین قابل بررسی و بهینه سازی است.کلیدواژه ها
Glutamate-specific endopeptidase, Periplasmic expression, Halo-thermo tolerant B. licheniformis SL-1, گلوتامات اندوپپتیداز, بیان پری پلاسمی, باکتری B. licheniformis SL-1اطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.