کلونینگ و بیان ژن کدکننده آنزیم لاکاز از باکتری باسیلوس پومیلوس سویه GAZ23
- سال انتشار: 1393
- محل انتشار: فصلنامه زیست شناسی میکروارگانیسمها، دوره: 3، شماره: 9
- کد COI اختصاصی: JR_BJM-3-9_002
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 403
نویسندگان
کارشناسی ارشد میکروبیولوژی، دانشگاه تهران، ایران
دانشیار میکروبیولوژی، دانشگاه تهران، ایران
استاد بیوشیمی، دانشگاه تربیت مدرس، ایران
چکیده
مقدمه: لاکازها (بنزن دیول اکسیژن اکسیدو ردوکتاز EC 1. 10. 3. 2 ) یکی از اعضا ی خانواده مالتی کوپر اکسیدازها هستند که اکسیداسیون طیف گسترده ای از ترکیبات فنولی را با استفاده از اکسیژن مولکولی کاتالیز میکنند. مواد و روش ها : ژن کدکننده آنزیم لاکاز از سویه GAZ23 بهوسیله پرایمرهای کلونینگ اختصاصی ژن تکثیرشد. محصول PCR در ناقل بیانی ( pET21a ) کلون به باکتری اشریشیاکلی سویه BL21(DE3) انتقال یافت و تحلیل توالی انجام شد. بیان آنزیم با استفاده از سوبسترای معمول لاکاز ABTS سنجیده شد. نتایج: توالی ژن S rDNA 16 سویه بومی GAZ23 که از خاکهای ایران جدا شده است دارای 100 درصد شباهت به باکتری باسیلوس پومیلوس بود. ژن لاکاز در سویه GAZ23 دارای 1533 نوکلئوتید است که 510 آمینواسید را کد میکند. بحث و نتیجه گیری: ژن لاکاز سویه GAZ23 دارای 67 درصد شباهت آمینواسیدی به پروتئین CotA باکتری باسیلوس سوبتیلیس است. به منظور به دست آوردن مقادیر بالای پروتئین محلول، بیان، تحت شرایط میکروآئروبیک و در دمای پایین انجام شد. 4 دمین غنی از هیستیدین متصل شونده به مس در توالی آمینواسیدی این پروتئین وجود دارد .کلیدواژه ها
پروتئین CotA, لاکاز, باسیلوس پومیلوس, بیان ژناطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.