زیر همسانه سازی و بیان آنتی ژن کایمر C-CFTX1-STxB زهر عروس دریایی و بررسی آنتی ژنیسیتی آن در موش سوری
- سال انتشار: 1398
- محل انتشار: مجله علمی پژوهشی دانشگاه علوم پزشکی ایلام، دوره: 27، شماره: 5
- کد COI اختصاصی: JR_SHIMU-27-5_003
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 410
نویسندگان
مرکز علم و فناوری زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام حسین(ع)، تهران، ایران
مرکز علم و فناوری زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام حسین(ع)، تهران، ایران
مرکز علم و فناوری زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام حسین(ع)، تهران، ایران
چکیده
مقدمه: گزش عروس دریایی جعبه ای دردناک بوده و می تواند مهلک باشد. زهر گونه C. fleckeri حاوی انواع پروتئین های فعال زیستی است. دو مورد از فراوان ترین پروتئین های موجود در این گونه، CfTX-1 و CfTX-2 است که با استفاده از روش الکتروفورز یا کروماتوگرافی به راحتی قابل جداسازی نمی باشند. فناوری بیان نوترکیب، جایگزینی مناسب برای جداسازی پروتئین طبیعی زهر می باشد. هدف از این مطالعه، بیان پروتئین C-CfTX1-STxB در E.coli و بررسی آنتی ژنیسیتی آن در موش سوری می باشد. مواد و روش ها: ژن کامل CfTX1 صناعی در پلاسمید pUC57 تهیه شد. قطعه CfTX-1 C- به وسیلهPCR تکثیر و با جایگاه های آنزیمی BamHI وSalI در وکتور بیانی pET28a-stxB زیر همسانه سازی و به باکتری E.coli ترانسفورم شد. بیان ژن تحت القایIPTG انجام گردید. پس از تخلیص پروتئین و تزریق به موش سوری، میزان آنتی بادی تولید شده در سرم اندازه گیری شد. هم چنین موش ها به وسیله زهر عروس دریایی Rhopilema nomadica چالش شدند. یافته های پژوهش: در این مطالعه تجربی، ژن C-CfTX1-STxB، کلون شده در وکـــتور بیانی pET28a(+) به وسیله PCR، توالی یابی و با آنالیز آنزیمی تایید گردید. هم چنین پروتئین نوترکیب تولید شده به وسیله وسترن تایید شد. آنتی بادی تولید شده در سرم، توسط تست الایزا کمیت سنجی شد. بحث و نتیجه گیری: موش های ایمن شده در چالشی پس از 60 روز، 50 برابر LD50 زهر عروس دریایی را تحمل می نمایند. با توجه به عدم خاصیت کاردیوتوکسیستی و نوروتوکسیستی پروتئین نوترکیب، این پروتئین تولید شده می تواند به عنوان کاندید واکسن زهر عروس دریایی در موش سوری یا در مراحل بعدی کارآزمایی بالینی برای انسان پیشنهاد شود.کلیدواژه ها
Antigenicity, C-CFTX1-STxB chimeric antigen, Chironex fleckeri, Jellyfish venom, Chironex fleckeri, زهرعروس‌دریایی, آنتی‌ژن کایمر C-CfTX-1-STxB, آنتیژنیسیتیاطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.