همسانه سازی فرم اصلاح شده ژن tPAانسانی در ناقل کلروپلاستی و باززایی گیاهان ترانس پلاستومیک توتون
محل انتشار: فصلنامه بیوتکنولوژی کشاورزی، دوره: 6، شماره: 3
سال انتشار: 1393
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: انگلیسی
مشاهده: 348
فایل این مقاله در 18 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
این مقاله در بخشهای موضوعی زیر دسته بندی شده است:
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_JOAGK-6-3_010
تاریخ نمایه سازی: 15 آذر 1399
چکیده مقاله:
گیاهان جایگزین مناسبی برای سیستمهای معمول بیان پروتئینهای نوترکیب و داروهای زیستی، نظیر حیوانات یا سیستمهای میکروبی تراریخته میباشند. به دلیل پلیپلوئیدی بالای ژنوم پلاستید گیاهی، در صورت تراریختی کلروپلاست، هزاران نسخه از ژن خارجی در هر سلول وارد و حجم بسیار بالایی از پروتئین نوترکیب تولید میشود. پس از سرطانها، بیماریهای قلبی- عروقی دومین عامل مرگ و میر انسانی هستند. فعالکننده پلاسمینوژن بافتی انسانی (tPA) یکی از مهمترین پروتئینهای نوترکیب داروئی است که جهت از بین بردن لخته خون در قسمتهای مختلف بدن از جمله رگهای خونی قلب و مغز استفاده میشود. فرم اصلاح شده پلاسمینوژن بافتی (K2S) دارای نیمه عمر پلاسمایی طولانیتر، قدرت نفوذ در لخته و فعالیت فیبرینولیتیک بالاتر میباشد. در این مطالعه، بهمنظور انتقال ژن K2S به کلروپلاست گیاه توتون، پس از طراحی سازه، ژن هدف در ناقل کلروپلاستی pKCZ درج و سپس در باکتریcoli .E همسانهسازی گردید. پس از شلیک موفق ناقل حاوی ژن K2S (pKCZK2S) به ریزنمونههای برگی با استفاده از تکنیک بیولستیک، ریزنمونهها بر روی محیط انتخابی حاوی 500 میلی گرم در لیتر آنتی بیوتیک اسپکتینومایسین قرار گرفتند. پس از باززایی نوساقههای رشد یافته بر روی محیط انتخابی، به منظور رسیدن به هموپلاسمی چهار دوره انتخاب و باززایی در حضور آنتیبیوتیک اسپکتینومایسین انجام شد. حضور، درج در جایگاه مشخص، بیان ژن K2S و هموپلاستی در گیاهان ترانسپلاستومیک با روشهای PCR، RT-PCR و سادرن بلات به تایید رسید.
کلیدواژه ها:
مراجع و منابع این مقاله:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :