ردیابی و تشخیص هم زمان دو ویروس مهم بذرزاد لوبیا ‭( BCMV ‬و ‭BCMNV) ‬با استفاده از روش ‭Multiplex Reverse Transcription-PCR ‬جهت بکارگیری در برنامه گواهی بذر کشور

  • سال انتشار: 1392
  • محل انتشار: سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی
  • کد COI اختصاصی: R-1092226
  • زبان مقاله: فارسی
  • تعداد مشاهده: 343
دانلود فایل این طرح

نویسندگان

نوح شهرآیین

عباس سعیدی

عبدالباسط عزیزی

سحر وحیدحسین نیا

مهدی افضلی

چکیده

ویروس موزاییک معمولی لوبیا ‭(BCMV) ‬و ویروس موزاییک معمولی نکروتیک لوبیا ‭(BCMNV) ‬در اغلب مناطق کشت لوبیا در دنیا از پراکنش گسترده ای برخوردار میباشند. آلودگی مزارع لوبیا و خسارت ناشی از این دو پوتی ویروس ‭potyvirus) (‬از مناطق مختلف کشت و پرورش لوبیا در ایران گزارش شده است. در صورت استفاده از روشهای متعارف تشخیصی مثل سنجش سرولوژیکی الایزا ‭( ELISA ) ‬آلودگی توام به این دو ویروس در نمونه های لوبیای آلوده مشاهده میگردد. روشهای تشخیص مولکولی برای شناسایی این دو ویروس و سایر ویروسهای آلوده کننده لوبیا راه اندازی شده اند، اما تاکنون روش ‭Multiplex RT- PCR ‬برای تشخیص همزمان این دو ویروس در ایران و در یک نمونه ارایه نشده است. بنابراین هدف از این تحقیق راه اندازی و توسعه سیستم ‭Multiplex RT- PCR ‬برای تشخیص همزمان این دو ویروس در یک نمونه است. تلفیقی از پرایمرهای اختصاصی و پروب های مختلفی برای تشخیص دو ویروس ‭BCMV‬و ‭BCMNV ‬طراحی و بهینه سازی گردید. واکنشهای مولکولی مختلفی بصورت تکی ‭ (uniplex)‬و چندتایی بطور همزمان جهت رفع مشکلات و کاستی های مراحل تشخیص همزمان این دو ویروس بصورت تقاطعی صورت گرفت. واکنشهای تشخیص همزمان این دو ویروس با اندک تفاوتی در واکنشهای تکی و چندتایی موفقیت آمیز بود. بکارگیری این روش در تشخیص همزمان چند ویروس نه تنها در بهبود و توسعه روشهای تشخیصی از نقطه نظر کاهش در زمان و هزینه آزمایشات چند مرحله ای موثرند، بلکه به عنوان یک ابزار در دسترس جهت مطالعات اکولوژیکی و اپیدمیولوژیکی ، بررسی سلامتی بذور از عوامل بیماریزای بذر زاد ، روابط متقابل میزبان و عامل بیماریزا مفید واقع خواهند شد، بخصوص در حالتی که یک میزبان ( لوبیا) به هر دو عامل بیماریزا آلوده شده باشد. واژه های کلیدی : تشخیص مولکولی-آزمون مالتی پلکس پی سی ار- ویروس لوبیا ، آلودگی همزمان

کلیدواژه ها

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.