تهیه گرده افشان دیپلویید مقاوم به نماتد از توده اصلاحی چغندرقند

به منظور تهیه والدگرده افشان دیپلویید مقاوم به نماتد سیستی از توده های اصلاحی امید بخش که حاصل تلاش محققان موسسه تحقیقات اصلاح وتهیه بذر چغندرقند می باشند، یک توده مقاوم ‮‭261‬*(‮‭20314‬*‮‭1009‬‭-W) ‬که بر اساس نتایج حاصل از ارزیابی محصولی، آزمون مقاومت در گلخانه انتخاب شده است، در این تحقیق به کار رفت. این توده در سال اول در برنامه سلکسیون قرار گرفت و بوته ها در مزرعه علامت گذاری و نمونه های برگی جهت استخراج ‭DNA ‬تهیه گردید و سپس ارزیابی مولکولی گیاهان حامل ژن مقاومت با استفاده از نشانگر مولکولی ‭STS ‬و آزمون ‭PCR ‬اختصاصی انجام گرفت. در سال دوم این تحقیق، ریشه های ورنالیزه شده حامل ژن مقاومت پس از یادداشت برداری وضعیت حضور علایم گال بر روی ریشه ها در زیر کیج جهت تهیه بذر S1 در مزرعه ایزوله کشت گردیدند. بذور برداشت شده S1 همزمان در گلخانه جهت آزمون مولکولی و در مزرعه اشتکلینگ جهت تهیه ریشه کشت و درطول فصل زمستان در داخل مزرعه ورنالیزه شدند. نتایج آزمون مولکولی گیاهان S1 با استفاده از نشانگر1‭-Hs‬1‭pro ‬نشان داد که حضور ژن مقاومت در لاین های S1 بین ‮‭25‬ تا ‮‭73‬ درصد متغیر است. در سال سوم، مانند سال قبل، ریشه های حامل ژن مقاومت که در زمستان سال قبل ورنالیزه شده بودند در زیر کیج جهت تهیه بذر S1 جدید در مزرعه ایزوله کشت گردیدند. بذور برداشت شده S1 همزمان در گلخانه جهت آزمون مولکولی و در مزرعه اشتکلینگ جهت تهیه ریشه کشت شدند. همچنین بذر سه هیبرید سینگل کراس مقاوم به ریزومانیا در اشتکلینگ کشت شدند. نتایج آزمون مولکولی گیاهان S1 با استفاده از نشانگر 1‭-Hs‬1‭pro ‬نشان داد که حضور ژن مقاومت در لاین های S1 منتخب بین ‮‭39‬ تا ‮‭70‬ درصد متغیر است. در سال چهارم، هفت لاین گرده افشان S1 منتخب با سه هیبرید سینگل کراس نرعقیم در ایزوله های جداگانه با یکدیگر تلاقی داده شدند. در نهایت بذر ‮‭21‬ هیبرید دیپلویید بدست آمد تا در فاز بعدی این پروژه در مناطق آلوده به نماتد سیستی مورد ارزیابی مقاومت و عملکرد قرار گیرند. واژه های کلیدی : چغندرقند، نماتد سیستی، مقاومت، گرده افشان، دیپلویید، نشانگر مولکولی.