بررسی کارایی انتقال ژن به سلول های گیاهی با استفاده از نانوذرات طلا به ابعاد 50 تا 1000 نانومتر و انتقال ژن های مقاومت به تنش های زیستی و غیرزیستی به برنج
- سال انتشار: 1390
- محل انتشار: سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی
- کد COI اختصاصی: R-1058831
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 332
نویسندگان
چکیده
به منظور مقایسه کارایی انتقال ژن به گیاه برنج به روش تفنگ ژنی با استفاده از نانوذرات طلا، ابتدا نانوذرات طلا به قطر ،100 ،600 200 و 1000 نانومتر تهیه شد. سپس پلاسمید pAct1D حاوی ژن gus بر روی ذرات مذکور رسوب داده شد و در قالب طرح کاملا تصادفی با سه تکرار به روش تفنگ ژنی به کالوس های جنین زای برنج منتقل گردید تا اندازه بهینه ذرات برای استفاده در انتقال ژن اصلی به دست آید. نتایج نشان داد که کارایی استفاده از نانوذرات طلا حداقل به اندازه ی میکروذرات مرسوم می باشد. سپس سه سازه پلاسمیدی مشتمل بر دو سازه پلاسمیدی حاوی ژن کولین اکسیداز (CodA) یکی برای تجمع گلایسین بتایین در سیتوزول (pABRII-Cyt) و دیگری برای تجمع گلایسین بتایین در کلروپلاست (pABRII-Chl) و یک سازه پلاسمیدی حاوی ژن مانیتول-1-فسفات دهیدروژناز (mtld) موسوم به pABRII-mtld برای ایجاد تحمل به تنش های غیرزیستی به خصوص شوری و خشکی ساخته شد، و به همراه دو سازه پلاسمیدی دیگر که یکی حاوی ژن cryIA(c) برای ایجاد تحمل نسبت به تنش زیستی آفات پروانه ای موسوم به pUBC و دیگری حاوی ژن هیگرومایسین فسفوترانسفراز (hph) به عنوان ژن گزینشگر گیاهی موسوم به pTra132 بود، مورد استفاده قرار گرفت. سپس این پلاسمیدها در روش تراریزش توام برای تراریزش کالوس جنین زای برنج که از کشت بذور بالغ برنج رقم هاشمی به دست می آمد، به کار گرفته شد. گیاهچه های تراریخته احتمالی به دست آمده از این برنامه های جداگانه انتقال ژن توسط آنالیزهای مولکولی مختلف شامل آنالیز واکنش زنجیره ای پلی مراز (PCR)، آنالیز سادرن و آنالیز واکنش زنجیره ای پلی مراز با رونوشت برداری معکوس (RT-PCR) مورد بررسی دقیق قرار گرفتند و در نهایت صحت انتقال ژن، ادغام حداقل یک نسخه از ژن های مورد انتقال در ژنوم و نیز رونویسی برای بیان این ژن ها در گیاهان مزبور به اثبات رسید. بررسی دقیق تر اثرات ژن های انتقال یافته به انجام آزمایش های فیزیولوژیکی دقیق تر و زیست سنجی به خصوص در نسل های آینده بستگی دارد. واژه های کلیدی: برنج، Oryza sativa L.، تراریزش، نانوذرات طلا، cryIA(c) ، مانیتول، گلایسین بتایین، سادرن، RT-PCR.کلیدواژه ها
اطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.