جداسازی و تخلیص توکسین اپسیلون کلستریدیوم پرفرینجنز تیپ D

همانگونه که از نام بخش تحقیق و تولید واکسنهای بیهوازی پیداست این بخش عهده دار تحقیق در خصوص واکسنهای بیهوازی دامی است. در حال حاضر تولید شش نوع واکسن کلستریدیایی دامی در دستور کار این بخش قرار دارد و با توجه به اینکه واکسنهای فوق توکسوییدی هستند. لذا توکسین در آنها نقش اساسی دراد و سنجش میزان ایمنی تولید شده توسط توکسین در بدن دام و به عبارت دیگر سنجش عیار آنتی بادی به طور هرچه دقیق تر نیازمند توکسین خالص است. لذا لزوم بکارگیری توکسین اپسیلون هرچه خالص تر در آزمایشات اندازه گیری قدرت ایمنی زایی واکسن تولید شده کاملا روشن است. بعلاوه تولید واکسنهای آنتی ایدیوتایپ آنتی بادی بر علیه توکسین اپسیلون بطور تجربی در برخی از نقاط جهان آغاز شده است. بنابراین با نگاهی به آینده در جهت تولید واکسنهای توکسوییدی خالص و همچنین تولید واکسن آنتی ایدیوتایپ آنتی بادی نیازمند تولید آنتی بادی منوکلونال بوده و برای تولید آنتی بادی منوکلونال به توکسین خالص نیازمندیم. جنس کلستریدیوم شامل گروهی از باکتری های گرم مثبت بیهوازی است که در غیاب اکسیژن رشد کرده و اسپورهای مقاوم به حرارت ایجاد می کند. کلستریدیوم پرفرینجنز در روده انسان و دام بطور شایع وجود داشته و جز فلور طبیعی آن است و دارای 5 تیپ بوده و تعدادی توکسین اصلی و فرعی تولید می کند. در این تحقیق از کشت کلستریدیوم پرفرینجنز تیپ ‭D ‬در فرمانتور استفاده شده و پس از بدست آوردن فیلترات و ترسیب و دیالیز آن آنرا فریز درای نموده سپس با استفاده از کروماتوگرافی ستون سلولز ‭DEAE ‬و متعاقبا کروماتوگرافی ستون سفادکس توکسین اپسیلون بدست آمد و کلیه ترکیبات حاصله از فرآیندهای مذکور مورد الکتروفورز ‭SDS-PAGE ‬قرار گرفت. توکسین حاصل مورد آزمایش حداقل دز کشنده قرار گرفت و پس از تایید با استفاده از تکنیک اکتولونی واکشن توکسین خالص با آنتی توکسین اپسیلون در حضور کنترل مثبت و کنترل منفی مورد سنجش قرار گرفت و وجود توکسین خالص تایید گردید. کلید واژه ها : کلستریدیوم پرفرینجنز تیپ ‭D ‬، توکسین اپسیلون ، تخلیص