خالص سازی کوکلودینیوم و بررسی مقایسه ای روش های کشت انبوه آن

  • سال انتشار: 1390
  • محل انتشار: سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی
  • کد COI اختصاصی: R-1058289
  • زبان مقاله: فارسی
  • تعداد مشاهده: 273
دانلود فایل این طرح

نویسندگان

رضا قربانی واقعی

غلامحسین فقیه

رسول قربانی

علیرضا اسدی

اکبر پای گذار

فاطمه محسنی زاده

غلامحسین دلیرپور

آرش حق شناس

مریم فلاحی

حسن توکلی

محمود حافظیه

چکیده

کوکلودینیوم‭Cochlodinim polykrikoides) ) ‬یک دینوفلاژل بوده که با شکوفایی خود در آبهای ساحلی جهان بعنوان یکی از عوامل مرگ و میر ماهیان شناخته شده و از سال ‮‭1387‬ در آبهای خلیج فارس مشاهده شده است. پس از خالص سازی جلبک کوکلودینیوم با استفاده از نور، کشت جلبک کوکلودینیوم با استفاده از محیط کشت های مختلفی شامل ‭f/‬2‭(modyfied)‬، گیلارد ‭(f/‬2‭-Si)‬، ‭TMRL‬، ‭Conway‬، ‭ESM ‬و محیط حاصله از مخلوط سازی آب شور با رسوبات ساحلی انجام شد. کشت کوکلودینیوم در لوله های آزمایش، ارلن های ‮‭200-1000‬ میلی لیتری و آکواریوم های ‮‭16‬ لیتری (هر یک با ‮‭10‬ لیتر آبگیری) با 3 تکرار در هر تیمار انجام گرفت. فقط محیط کشت گیلارد ‭f/‬2 ‭(modyfied) ‬امکان کشت انبوه این گونه را در حد آکواریوم میسر ساخت. کشت کوکلودینیوم با استفاده از محیط کشت ‭TMRL ‬در آکواریوم نتایج مطلوبی را نداشته و فقط در یک آکواریوم از 3 آکواریوم تراکم تا ‮‭910000‬ سلول در لیتر رسید. استفاده از محیط کشت گیلارد ‭f/‬2 ‭(modyfied) ‬در لوله آزمایش و ارلن های ‮‭100‬ میلی لیتری تا ‮‭1000‬ میلی لیتری موجب شکوفایی مناسب کوکلودینیوم گردید. که حداکثر تعداد شمارش شده در تیمارها (با 3 تکرار در هر تیمار) درلوله آزمایش /‮‭3/283/000‬ سلول (در مدت ‮‭15‬ روز)، در ارلن ‮‭200‬ میلی لیتری /‮‭6/393/000‬ سلول (درمدت ‮‭22‬ روز)، در ارلن ‮‭500‬ سی سی /‮‭2/833/000‬ سلول (در مدت‮‭40‬ روز) و در آکواریوم /‮‭3/600/000‬ سلول (در مدت ‮‭46‬ روز) اندازه گیری گردید. البته کشت جلبک با استفاده از محیط کشت ‭TMRL ‬در لوله آزمایش و ارلن ها با موفقیت انجام، ولی با افزایش حجم ارلن ها سرعت تکثیر و شکوفایی کوکلودینیوم کمتر از محیط کشت گیلارد ‭f/‬2 ‭(modyfied) ‬بود. بیشترین میانگین حاصله از جلبک کوکلودینیوم در هر لیتر از تیمارها، با استفاده از محیط کشت ‭TMRL ‬در لوله آزمایش /‮‭2/683/000‬ سلول (در مدت ‮‭12‬ روز)، در ارلن ‮‭100‬ سی سی /‮‭3/207/000‬ سلول (در مدت ‮‭36‬ روز)، در ارلن ‮‭250‬ میلی لیتری /‮‭3/040/000‬ سلول (در مدت ‮‭18‬ روز)، در ارلن ‮‭1000‬ میلی لیتری /‮‭2/325/000‬ سلول (در مدت ‮‭34‬ روز) در آکواریوم /‮‭550/000‬ سلول (در مدت ‮‭28‬ روز) بوده است. تکثیر ناموفق کوکلودینیوم در محیط کشت‭Conway ‬، گیلارد ‭(f/‬2‭-Si) ‬و محیط حاصله در زمان ترکیب آب با شوری ‮‭32‬ قسمت در هزار و رسوبات ساحلی، حتی در لوله های آزمایش، نشانگر عدم مناسب بودن محیط های ذکر شده می باشد. در زمان استفاده از محیط کشت ‭ESM‬، با افزایش اندازه ارلن، این محیط کشت، از اثرات مثبت کمتری برخوردار و فقط در لوله های آزمایش و ارلن های ‮‭100‬ میلی لیتری تا حدودی موفق بود. در واقع می توان نتیجه گرفت که شکوفایی و کشت انبوه کوکلودینیوم نیازمند شرایط خاص و محیط کشت ویژه ای است که فقط با استفاده از محیط کشت گیلارد ‭f/‬2 ‭(modyfied) ‬تحقق یافته است. حداکثر تراکم ایجاد شده در تحقیق حاضر ‮‭6/5‬ میلیون سلول در لیتر در یک آکواریوم (میانگین تعداد در 3 تکرار از این تیمار /‮‭3/600/000‬ سلول در لیتر) با محیط کشت ‭f/‬2 ‭(modified) ‬بوده است. با توجه به موارد ذکر شده می توان به ارجحیت محیط کشت گیلارد ‭f/‬2 ‭(modyfied) ‬نسبت به محیط کشت ‭TMRL ‬و سایر محیط های کشت مورد استفاده پی برد. کلمات کلیدی: کوکلودینیوم، محیط کشت های مختلف، تراکم سلولی، شرایط آزمایشگاهی.

کلیدواژه ها

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.