تولید آزمایشگاهی ‭PPD ‬مالیین

مشمشه که اولین بار توسط ارسطو شرح داده شد، یکی از مهمترین بیماریهای زیونوز میباشد. در سالهای اخیر این بیماری به عنوان یک بیماری نوپدید از گوشتخواران باغ وحش تهران و تک سمیان نقاط مختلف شمالغرب کشور گزارش و عامل بیماری جداسازی و تعیین هویت شده است. معتبرترین تست تشخیصی در اسب بر اساس دستورالعمل ‭OIE ‬تست تزریق داخل جلدی پلک با استفاده از ‭PPD ‬مالیین میباشد. هدف اصلی از این تحقیق تولید ‭PPD ‬مالیین جهت شناسایی اسب های آلوده به باکتری بورخولدریا مالیی در راستای برنامه کنترل و ریشه کنی مشمشه در ایران می باشد. جهت تولید این فرآورده ابتدا به منظور افزایش حدت باکتری، سویه بورخولدریا مالیی تولیدی بخش تحقیق و تهیه توبرکولین و مالیین پس از سه بار پاساژ متوالی در خوکچه هندی و مشاهده واکنش اشتراوس، از بیضه حیوان جداسازی و تعیین هویت بیوشیمیایی و ملکولی گردید. سپس باکتری در محیط ژلوز و بویون گلیسرینه کشت و پس از تایید خلوص، جهت تولید انبوه فرآورده، بذر کاری در حجم ده لیتر محیط دورسه هنلی کشت گردید. پس از گذشت ‮‭70‬ روز باکتری غیر فعال شده و پروتیین های استحصالی باکتری توسط تری کلرو استیک اسید ترسیب شد و سپس پروتیین محصول نهایی به میزان ‮‭0/95‬ تا ‮‭1/05‬ میلی گرم در میلی لیتر تنظیم گردید. جهت انجام آزمون تعیین قدرت، فرآورده در خوکچه های هندی و اسب هایی که بصورت تجربی با باکتری کشته حساس شده بودند، تلقیح گردید. در نهایت فرآورده پس از گذراندن تمامی تست های کنترلی توصیه شده ‭OIE‬، توسط سازمان دامپزشکی کشور در نقاطی از ایران که گزارش اسب مشکوک به مشمشه داشتند، همراه با مالیین بروت بکار گرفته شد. استفاده از ‭PPD ‬مالیین تولید شده پس از تزریق به اسب های مشکوک در مراحل فیلدی نشان داد که بدلیل کمتر بودن میزان آنتی ژن این فرآورده نسبت به مالیین بروت، واکنش های حاصله از شدت کمتری برخوردار است و حساسیت این فرآورده نسبت به مالیین بروت پایینتر میباشد ولی ویژگی آن نسبت به مالیین بروت بالاتر است. کلمات کلیدی: مشمشه، بورخولدریا مالیی، ‭PPD ‬مالیین