انگشت نگاری ژنومی مایکوباکتریوم بویس سویه ‭AN5 ‬مورد استفاده در تولید توبرکولین گاوی با استفاده از تکنیک ‭RFLP‬

  • سال انتشار: 1391
  • محل انتشار: سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی
  • کد COI اختصاصی: R-1056679
  • زبان مقاله: فارسی
  • تعداد مشاهده: 182
دانلود فایل این طرح

نویسندگان

رضا عارف پژوهی

کیوان تدین

نادر مصوری

کیومرث سلیمانی

روح ا کشاورز

نفیسه شکیبامهر

عزت اله قهرمانلو

محمد محمدطاهری

علی شکیبامهر

چکیده

به منظور داشتن ‮‭10‬ نسل متوالی ده پاسا بر روی لوله های حاوی محیط کشت اختصاصی لوانشتاین جانسون پیروات دار‭((LJP ‬انجام شد و لوله ها به مدت 2 ماه در انکوباتور ‮‭37‬ درجه نگهداری گردید. از کلونی های رشد یافته هر لوله یک لوپ کامل باکتری استحصا ل و پس از غیر فعال سازی در دمای ‮‭80‬ درجه سانتی گراد عملیات استخراج ‭DNA ‬انجام گرفت .پس از ارزیابی کمی و کیفی ‭DNA ‬استخراج شده، هضم آنزیمی با استفاده از دو آنزیم ‭PvuII ‬و ‭AluI ‬به مدت یک شبانه روز در دمای ‮‭37‬ درجه سانتی گراد انجام گردید.در مرحله بعد انتقا ل ‭DNA ‬هضم شده بر روی آگارز %1 پروسه انتقال ‭DNA ‬از روی ل آگارز برروی ممبران با شار مثبت با تکنیک مویینگی انجام شد(ساترن بلاتینگ).سپس ‭DNA ‬منتقل شده بر روی نایلون در دمای‮‭120‬ درجه سنتیگراد به مدت ‮‭20‬ دقیقه تثبیت گردید وپس از عملیات هیبریداسیون با کمک پروب های ‭PGRS ‬و ‭DR‬، نهایتا" ممیرین حاصل با استفاده از ‭NBT ‬و ‭BCIP ‬رنگ آمیزی گردید. نتایج به دست آمده بیانگر وجود الگوهای مشابه در تمامی نسل های مورد بررسی در ‭DNA ‬هضم شده با آنزیمهای فوق بوده و هیچ گونه تفاوتی در تعداد باندها یا سایز ملکولی آنها مشاهده نشد.

کلیدواژه ها

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.