تولید آزمایشگاهی 100 bp DNA مارکر الکتروفرز
- سال انتشار: 1391
- محل انتشار: سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی
- کد COI اختصاصی: R-1056591
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 508
نویسندگان
چکیده
سایز مارکرها از قطعات با اندازه مولکولی مشخص تشکیل می گردند که در جریان ژل الکتروفورز در مجاورت قطعه یا قطعات با اندازه نامعلوم رانده می شوند تا امکان تخمین اندازه این قطعات را فراهم نمایند. نمونه های تجاری سایز مارکرها معمولا بر اساس هضم آنزیمی ژنوم فاژ لامبدا تهیه می شوند و علیرغم استفاده گسترده در آزمایشگاه های مولکولار بیولوژی عمدتا از قیمت قابل ملاحظه ای برخوردار می باشند. در مطالعه حاضر یک روش نسبتا ساده و کم هزینه بر مبنای PCR جهت تولید سایز مارکر با قطعات 100 زوج باز شرح داده شده است. بر مبنای ژنوم سویه Bacillus anthracis Sterne 34F2، ده زوج پرایمر جهت تکثیر ده قطعه ژنتیکی به طول دقیقا ،200 100 ، 300 ... و 1000 زوج باز طراحی گردید. اجزا و شرایط PCR به گونه ای تنظیم گردیدند که هر 10 واکنش PCR به صورت همزمان و بر اساس یک پروتکل اجرا گردیدند. محصولات ده گانه PCR جهت اطمینان از اندازه تعیین توالی نوکلیوتید گردیدند. مقادیر مختلف از محصولات PCR تهیه و پس از خالص سازی تجمیع گردیدند. کمیت های تلفیقی مختلف اجزا سایز مارکر ابداعی در مقایسه با نمونه های تجاری مشابه بررسی گردید. یافته های مقدماتی کیفیت نسبتا مطلوب این محصول را با توجه به هزینه اندک و روش ساده تهیه آن نشان دادند اما تعیین میزان پایداری و تثبیت مقادیر کمی و کیفی اجزا این سایز مارکر احتیاج به مطالعه و کار بیشتر خواهد داشت. کلمات کلیدی: DNA size marker - PCR - Loading buffer - Electrophoresis - 100 bpکلیدواژه ها
اطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.