بهینه سازی سنجش آنزیم سلولاز در تریکودرما با روش استفاده از محیط کشت Test Plate

بسیاری از آنزیمهای هیدرولازی بهویژه آنزیمهای سلولاز exo β-1,4 glucanase ،endo β-1,4 glucanaseوβ-glucosidase و cellobiohydrolase وظیفه ی اختصاصی ازبین بردن اجزاء تشکیل دهندهی دیواره ی سلولی قارچی را بر عهده دارند. قارچ تریکودرما به دلیل ترشح آنزیم سلولاز، عامل قوی در کنترل بیولوژیک بیمارگرهای قارچی کاربرد دارد. از این رو غربالگری اولیه جدایه های تریکودرما از نظر تولید آنزیم سلولاز با روشی مناسب و قابل اعتماد اهمیت زیادی دارد. در این تحقیق شرایط بهینه برای بررسی سنجش آنزیم سلولاز در روش استفاده از محیط کشت Test Plateمورد مطالعه قرار گرفت از رنگهای واکنشی فنل قرمز Phenol Red و کنگو قرمز Congo Red در مقادیر 0.5و0.05و0.015 درصد در شرایط اسیدیته های مختلف درحضور سه ماده پایه به عنوان منبع کربن شامل کربوکسی متیل سلولز CMC برای اندازه گیری اندوگلوکاناز آویسل Avicel برای اندازه گیری اگزوگلوکاناز و سلوبیوز cellobios برای اندازه گیری بتا گلوکوزیداز استفاده شد. بدین منظور از 17 جدایه مختلف تریکودرما با تولید آنزیمی متفاوت استفاده شد. قطر هاله ایجاد شده در روز سوم برای هر جدایه اندازه گیری شد. نتایج نشان داد که از بین رنگهای واکنشی، فنل قرمز با مقدار 0.015 درصد در شرایط pH5 بهترین رنگ برای ردیابی آنزیم سلولاز در این روش می باشد بطوریکه اندازه گیری قطر هاله به راحتی انجام می شود و حالت بازدارندگی برای رشد قارچ ندارد

کلیدواژه ها:

تریکودرما ، سنجش سلولاز ، تست پلیت